pcr实验流程和注意事项，PCR实验室遇到的常见问题

妞宝 • 2023-03-02 12:02:00 • 知识百科

时下，受到新冠肺炎疫情的影响，让核酸检测成为群众生活的常态，让 “绿码”核酸检测结果成为出入公共场所的有效通行证，准确判断核酸检测结果与广大群众的生命安全有着直接关系。而这一结果的得出需要医务工作者面对沉重的工作压力，冒着被感染的风险，做核酸采集、检测，并通过技术手段，将病毒从人群中找出来。这项时下最为“热门”的技术，我们称之为PCR，也就是聚合酶链式反应，是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术，它可看作是生物体外的特殊DNA复制，PCR 的最大特点是能将微量的DNA 大幅扩增，放大，用于后续的检测和基因比对。PCR 技术还对应着专门的实验室，本文为大家做一个简单介绍，PCR实验室新冠病毒核酸检测操作中繁杂而又严谨的注意事项，让我们更好地尊重和理解医务工作人员的不易。

新冠病毒的核酸检测

新冠核酸病毒检测是检测新冠病毒核酸RNA。因为新冠病毒有着一层病毒外壳，在壳的内部存在核酸RNA，其中的病原体组成是核酸与外壳。其中的核酸RNA对于复制与合成蛋白质来说，拥有传递遗传物质与存储的作用，如同染色体一样，对于生长和变异以及遗传等重大生命现象有着决定性的作用。借助PCR的方式检测其中的核酸，而这些核酸可以从人体的血液、鼻咽部、大便以及尿液中检测出来。因为核酸RNA的检测敏感性较高，如果存在病原体时，核酸RNA直接变为阳性，以便确诊我们是否患病。这也是目前最为普遍应用的一种方式。

在研究了新冠病毒核酸检测是什么之后，就要对PCR实验室新冠病毒核酸检测遇到的常见问题进行分析，总结经验，以更好地保障检测结果的准确性和合理性。接下来让我们一起看看常见的问题有哪些吧？

PCR实验室新冠病毒核酸检测遇到的常见问题

新冠试剂的翘尾问题。在出现这个问题的时候，无论是VIC还是FAM都要按照规定开展复查工作，复查建议重新采样。若是不方便重新采样的时候，要重新提取原本样本之中的核酸。复查结果显示阴性就读阴性，若依然是翘尾，要仔细核对结果，排除实验室污染的影响，了解患者的个人信息。结合临床症状和接触史排查难以确认时，要重新采样复查，必要情况下，可以借助另外一家试剂进行检验。一旦出现大批量的弱阳性扩增翘尾，要首先对实验室污染进行排除，主要借助环境样本与阴性对照做验证工作。

怎么解释检测结果与临床诊断不一致的问题？有新冠病毒的RNA病毒拥有容易降解的特点，且当样本提取核酸浓度不一致些时候，就会导致两种结果不一致，这时要对相关因素进行逐一分析，查找问题的发生情况，保证核酸检验结果的准确性

如何解释生理盐水进行阴性对照使得内标增长的问题？由于使用的试剂以内源性内标为主，这时用人源基因进行标记的。而这种基因是存在人体表明细胞之中的，在实验操作的过程中，会出现人源性污染，同时环境污染也会导致这个问题的出现，所以要重视环境样本的质控工作。

如何处理新冠样本内标不出的问题？在面对这个问题的时候，必要时需进行复查样本的工作，重新混匀样本之后提取核酸。如果在对重新提取的核酸进行检查的过程中依然存在样本内标不出时，也排除了提取问题的时候，表示样本采集不合格，需要告知临床进行重新采样复查。

PCR实验室新冠病毒核酸检测操作的注意事项

在实际的PCR实验室新冠病毒核酸检测操作过程中，需要重视新冠病毒的生理特性，也就重视其传染源与传播途径的影响。虽然目前的传染源是新型冠状病毒感染者，但是无症状的感染者也会存在变为传染源的可能性。所以，要想保障核酸检测的结果，就要重视传染源的控制与检测。同时在进行PCR实验室新冠病毒核酸检测操作时，要严格按照要求与规范进行实验检测，减少污染问题的影响，保证受检者的检验结果准确。(泸溪县石榴坪乡卫生院杨牡芝)

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